Parti 2. Effetti ta 'kampi elettromanjetiċi ta' frekwenza estremament baxxa fuq l-inibizzjoni taċ-ċellula tat-tumur u l-mekkaniżmu possibbli
Inżammet aggregazzjoni spontanja ta 'ċelloli tat-tumur sospiżi, u inibizzjoni manjetika
deher.Fl-esperiment preċedenti fuq ċelloli tal-limfoma Raji, l-aggregazzjoni spontanja ta 'sospiżi
Iċ-ċelloli tat-tumur inqerdu u l-inibizzjoni manjetika sparixxiet. Aħna wrejna li l-kamp manjetiku għamel
ma jeżerċita l-ebda effett inibitorju fuq ċelloli tal-kanċer sospiżi liberament. F'dan il-grupp ta 'esperimenti, eżaminajna
Jekk il-kuntatt taċ-ċellula kellu rwol fl-effett tal-inibizzjoni manjetika fuq it-tkabbir tat-tumur. Ċelloli Raji aggregati
Fi clusters ġew studjati f'esperiment ta 'espożizzjoni kontinwa ta' 9-. Iċ-ċelloli ġew trasferiti għal con akbar
Tainer, filwaqt li l-mezz tal-kultura nbidel kull 3 ijiem. Grupp "Agglomerat": L-ebda proċeduri ma kienu kull
Iffurmat ħlief għal sostituzzjoni medja kull 3 ijiem u trasferiment għal kontenituri akbar. Grupp "imxerred": Prior
Għall-espożizzjoni ta 'kuljum, iċ-ċelloli ġew minfuħa b'arma tal-pipetta biex tissepara ċ-ċelloli f'sospensjoni u teqred
Struttura agglomerattiva.
In-numru inizjali taċ-ċelloli kollha kien 2 × 105. Il-Figura 3A turi li n-numru ta 'ċelloli Raji taħt sospensjoni
L-aggregazzjoni fil-kamp manjetiku kienet sinifikament inqas minn dik fil-grupp ta 'kontroll mhux espost, filwaqt li
In-numru ta 'ċelloli Raji taħt separazzjoni ta' sospensjoni fil-kamp manjetiku ma wera l-ebda differenza sinifikanti
meta mqabbel mal-kontroll mhux espost. Il-Figura 3B turi d-differenza fir-rata ta 'inibizzjoni tal-kamp manjetiku
Figura 2.Kurva tat-tkabbir taċ-ċelloli ta 'ċelloli tat-tumur Raji sospiżi liberament fil-gruppi ta' infużjoni u bidla. (a) Ċellula
Kurvi ta 'inibizzjoni taħt gradi differenti tal-freskezza tal-mezz tal-kultura. Taħt il-kundizzjoni taċ-ċellula
dispersjoni, ma nstabet l-ebda differenza sinifikanti bejn in-numru ta 'ċelloli esposti għall-kamp manjetiku u
dawk fil-grupp ta 'kontroll mhux espost. (b) kurvi tar-rata ta 'inibizzjoni taħt il-kundizzjoni tat-tixrid taċ-ċellula; il
Iċ-ċelloli tat-tumur ma kinux inibiti fuq esponiment tal-kamp manjetiku taħt gradi differenti tal-freskezza tal-kultura
medju. (c) raggruppament taċ-ċellula spontanja (lemin) u separazzjoni artifiċjali (xellug).
bejn iż-żewġ gruppi ta 'ċelloli (aggregazzjoni ta' sospensjoni u separazzjoni ta 'sospensjoni). Indika li ċ-ċelloli Raji
ġew inibiti mill-kamp manjetiku taħt il-kundizzjoni ta 'aggregazzjoni ta' sospensjoni. Sadanittant, iċ-ċelloli Raji kienu
mhux inibit mill-kamp manjetiku taħt il-kundizzjoni ta 'separazzjoni tas-sospensjoni. Iċ-ċelloli Raji kienu inqas sensittivi għal
Inibizzjoni manjetika minn ċelloli aderenti, u r-rata ta 'inibizzjoni taċ-ċelloli Raji f'Jum 6 kienet simili għal dik ta' A549
ċelloli fil-jum 3. Fin-nuqqas tal-kamp manjetiku, in-numru ta 'ċelloli Raji fil-grupp ta' aggregazzjoni sospiża
kien sinifikament ogħla minn dak fil-grupp ta 'separazzjoni sospiż. B'kuntrast, fuq esponiment għall-manjetiku
Qasam, in-numru ta 'ċelloli Raji fil-grupp ta' separazzjoni sospiż kien sinifikament ogħla minn dak fis-SUS
Grupp ta 'aggregazzjoni pendenti. Madankollu, fil-jum 9, l-inibizzjoni manjetika naqset jew sparixxiet. Irrepetew
l-esperiment biex jiġi ddeterminat ir-raġunijiet għall-għibien tar-rata ta 'inibizzjoni fil-jum 9. Ħadna ż-żona
Fil-qiegħ tal-kontenitur bħala l-kontroll biex tinvestiga jekk id-differenzi fid-densità tal-cluster taċ-ċelluli kkawżaw
it-tnaqqis tal-inibizzjoni manjetika (inqas kuntatt bejn iċ-ċelloli), u espona ċ-ċelloli fl-istat raggruppat
għal 5- mt, kamp manjetiku 20 Hz għal 9 ijiem. Il-mezz ikkundizzjonat inbidel kull 3 ijiem, u l-kbir
il-kontenitur ġie sostitwit. L-operazzjoni baqgħet ma nbidlitx għall-ewwel 6 ijiem. Fis-sitt jum tat-trasferiment,
Iċ-ċelloli ġew maqsuma f'kontenituri b'daqsijiet ta 'bażi differenti [10- cm petri (55- cm2) dixx u {25-} CM2 Culture Flask].
L-unika bidla kienet li ċ-ċelloli ġew trasferiti fil-jum 6, bl-użu tad-dixx 10- cm Petri (55 cm2) u 25- cm2
Flask (taħt żoni bażali differenti, il-mases taċ-ċelloli kienu aktar ikkonċentrati) bħala kontrolli. B’sorpriża, l-inibizzjoni
Ir-rata taċ-ċelloli Raji fil-flixkun 25- CM2 kienet għolja daqs 36% fil-jum 9. L-inibizzjoni taċ-ċelloli Raji fil- 10- cm Petri
Dish (55 cm2) sparixxa fil-jum 9 (Fig. 3C). Ir-riżultati kienu konsistenti ma 'sejbiet preċedenti. Ir-raġuni għal
Dan ir-riżultat għandu jkun relatat mal-qrubija taċ-ċelloli (Fig. 3D).
Figura 3.Agglomerat u inibizzjoni mxerrda ta 'ċelloli tat-tumur Raji sospiżi. (a) Kurva tat-tkabbir tas-sospiż
Ċelloli bi strutturi ta 'kuntatt differenti wrew li n-numru ta' ċelloli fil-grupp esposti għall-manjetiku
Il-qasam kien differenti b'mod sinifikanti minn dak fil - grupp mhux espost għall-kamp manjetiku taħt il-kundizzjoni ta '
aggregazzjoni taċ-ċelloli. Madankollu, ma nstabet l-ebda differenza sinifikanti bejn il-grupp espost għall-kamp manjetiku
u l-grupp mhux espost għall-kamp manjetiku taħt il-kundizzjoni tat-tixrid taċ-ċellula. (b) Differenza tal-istruttura
Kurva ta 'inibizzjoni: Iċ-ċelloli raggruppati kellhom inibizzjoni sinifikanti, iżda ċ-ċelloli mxerrda ma kellhom l-ebda inibizzjoni. (c) fuq
Jum 9, taħt l-istess volum u żoni bażali differenti, in-numru ta 'ċelloli fil-grupp b'żoni bażali iżgħar
imnaqqas b'mod sinifikanti (* p<0.05, vs the no-exposure control group; * P<0.05, vs the group with different bottle
żona) (d) Kif muri fil-figura, iċ-ċelloli ġabru aktar mill-qrib fil-flask tal-kultura, waqt li ċ-ċelloli fil-petri
Dish kienu mxerrdin fil-qiegħ minħabba l-livell baxx ta ’likwidu. (e) Kurva tat-tkabbir differenzjali taż-żona tal-qiegħ ta '
Il-bastiment tal-kultura fil-jum 9.
Il-potenzjal tal-membrana kien relatat mal-inibizzjoni tal-kamp manjetiku.L-esperimenti fuq sospiżi
Iċ-ċelloli tat-tumur urew li l-effett inibitorju tal-kamp manjetiku fuq iċ-ċelloli tal-kanċer twettaq permezz tal-kuntatt
u komunikazzjoni bejn iċ-ċelloli, li għandhom implikazzjonijiet għat-trasmissjoni tas-sinjal bejn iċ-ċelloli u l-bidliet joniċi
Fil-mikroambjent taċ-ċellula. Kalċju, sodju, potassju, u kits tal-pH Calbryte 520 AM, SBFI AM, PBFI AM,
u BCECF AM intużaw biex josservaw il-bidliet f'jonji ħielsa intraċellulari ta 'erba' tipi ta 'ċelloli wara 3 ijiem ta'
Esponiment manjetiku sabiex tinvestiga jekk it-trażżin tal-kamp manjetiku kienx assoċjat ma 'sinjal joniku
ing. Ma ġew osservati l-ebda tibdil fil-konċentrazzjonijiet tas-sodju intraċellulari u tal-joni tal-potassju
ċelloli (Fig. 4A u B). Ukoll, ma nstabet l-ebda differenza sinifikanti fl-intensità tal-fluworexxenza tal-pH fil-gruppi kollha taċ-ċelloli
minbarra A549 (Fig. 4C). Iċ-ċelloli T normali ta '293 T urew tnaqqis sinifikanti fil-joni tal-kalċju ħielsa intraċellulari
ċentrazzjoni. Iċ-ċelloli solidi tat-tumur ma wrew l-ebda bidla sinifikanti, filwaqt li ċ-ċelloli tat-tumur sospiżi wrew ħafif
żieda fil-konċentrazzjoni tal-joni tal-kalċju (Fig. 4D).
Bidla fil-konċentrazzjoni jonika tal-kalċju hija ġeneralment riflessa minn bidla fil-potenzjal tal-membrana. Il
Kit potenzjali tal-membrana DiBac4 (3) intuża biex josserva ċ-ċelloli esposti fil-jum 3 bi ΔIIF jikkorrispondi
Ir-razzjon tal-fluworexxenza tal-joni intraċellulari għal Jum 3 u inizjalment. Iċ-ċelloli aderenti wrew sinifikanti
Iperpolarizzazzjoni (ΔIIF 293 ċelloli T: −25%, ΔIIF Hepg2 ċelloli: −20% u ΔIIF A549 ċelloli: −13%). Iċ-ċellula tat-tumur
L-agglomerati wrew depolarizzazzjoni sinifikanti (ΔIIF raji ċelloli: +9%). Iċ-ċelloli tat-tumur sospiżi ħielsa wrew
L-ebda depolarizzazzjoni sinifikanti (Fig. 4e). Figuri S1 - S3 juru dejta dwar iċ-ċitometrija tal-fluss.
Figura 4.Differenzi fis-saħħa jonika u l-potenzjal tal-membrana taċ-ċelloli taħt 3- jum 5- mt 20- Hz manjetiku
Espożizzjoni fuq il-post. (a) Ma nstabet l-ebda differenza sinifikanti fl-intensità tal-fluworexxenza tal-joni tas-sodju wara 3 ijiem
ta 'espożizzjoni. (b) Ma nstabet l-ebda differenza sinifikanti fl-intensità tal-fluworexxenza tal-joni tal-potassju wara s-sodju
Esponiment għall-joni għal 3 ijiem. (c) Wara 3 ijiem ta 'espożizzjoni, ma nstabet l-ebda differenza sinifikanti fil-fluworexxenza
Intensità fil-gruppi kollha ta 'ċelloli ħlief A549. (d) Il-konċentrazzjoni tal-joni tal-kalċju fiċ-ċelloli T 293 naqset, filwaqt li
Ma ġiet osservata l-ebda differenza sinifikanti fil-konċentrazzjoni tal-joni tal-kalċju fil-gruppi l-oħra. (e) ċelloli aderenti
wera iperpolarizzazzjoni sinifikanti, l-agglomerati taċ-ċelloli tat-tumur urew depolarizzazzjoni sinifikanti, u l-liberament
Iċ-ċelloli tat-tumur sospiżi ma wrew l-ebda depolarizzazzjoni sinifikanti. Dawn il-bidliet jikkorrispondu għall-bidliet fi
konċentrazzjonijiet ta 'joni tal-kalċju intraċellulari (* P<0.05, vs the no-exposure control group).
Iċ-ċelloli sekreti sustanzi fil-mezz ikkundizzjonat, li jinteraġixxu mal-manjetiku
kamp biex jinibixxi ċ-ċelloli tat-tumur; is-sustanza kellha espressjoni universali u kienet speċifika tat-tumur
cific.Iċ-ċelloli A549 u Raji fl-agglomerati ġew esposti indipendentement għall-kamp manjetiku 5- MT għal 3 h sa
Iddetermina jekk l-inibizzjoni tal-kamp manjetiku kinitx relatata ma 'bidla fil-mezz ikkundizzjonat fl-istat
ta 'aggregazzjoni taċ-ċelloli. Il-mezz ikkundizzjonat imbagħad ġie trasferit għal ċelloli mhux esposti tal-istess speċi għal
2 ijiem. In-numru ta 'ċelloli fil-grupp A549 "Trasferiment" kien 4 × 105. In-numru ta 'ċelloli fir- "trasferiment" ta' Raji
Grupp kien 8 × 105. In-numru ta 'ċelloli fil-grupp A549 "jiġu trasferiti" kien 2 × 105. In-numru ta 'ċelloli ġewwa
Il-grupp Raji "jiġi trasferit" kien 4 × 105. Taħt dawn il-kundizzjonijiet, iċ-ċelloli fil-grupp A549 "jiġu trasferiti"
ġew inibiti b’mod sinifikanti b’rata ta ’madwar 10%, li kienet kważi nofs dik taċ-ċelloli b’direzzjoni
Esponiment fil-jum 1 fil-grupp ta 'infużjoni ta' fluwidu. Iċ-ċelloli fil-grupp Raji "jiġu trasferiti" ma wrew l-ebda inibizzjoni,
Iżda ċ-ċelloli fil-gruppi ta 'trasferiment ġew inibiti meta mqabbla ma' dawk fil-grupp ta 'kontroll mhux espost (Fig. 5A
u b).
Barra minn hekk, ċelloli T a549 u 293 T kienu esposti għall-kamp manjetiku 5- MT għal 3 h biex tiddetermina jekk dan
Il-mezz ikkundizzjonat kien uniku għaċ-ċelloli tat-tumur u inibix ċelloli normali. Il-midja tal-kultura esposta kienet dak iż-żmien
Trasferit għal għalf ċelloli mhux esposti mill-ispeċi differenti għal 2 ijiem. Ir-riżultati wrew li ċ-ċelloli A549 kienu
Inibixxa b'mod sinifikanti f'293 medja ta 'kultura. Iċ-ċelloli fil-grupp ta 'trasferiment 293 t ma wrew l-ebda inibizzjoni, iżda
Iċ-ċelloli fil-gruppi ta 'trasferiment kollha ġew inibiti meta mqabbla ma' dawk fil-grupp ta 'kontroll mhux espost (Fig. 5C u D).
Figura 5- Medju kkundizzjonat inibit it-tkabbir taċ-ċelloli tat-tumur. (a) Wara li ċ-ċelloli A549 kienu esposti għall-manjetiku
Qasam, il-mezz ikkundizzjonat ġie ffiltrat u mibdul bil-mezz ikkundizzjonat mhux espost. Il
Medju A549 ikkundizzjonat espost kellu effett inibitorju fuq iċ-ċelloli A549 mhux esposti. (b) Wara ċ-ċelloli Raji
ġew esposti għall-kamp manjetiku, il-mezz ikkundizzjonat ġie ffiltrat u sostitwit ma 'dak mhux espost
mezz ikkundizzjonat. Ma nstabet l - ebda differenza fl - għadd ta 'ċelloli bejn il-gruppi ta' bidla, iżda
In-numru ta 'ċelloli fil-grupp ta' bidla kien sinifikament inqas minn dak fil-grupp ta 'kontroll mhux trattat. (c) Numru
ta 'ċelloli A549 trasferiti mill - medju kkundizzjonat ta' 293 T espost imnaqqas b'mod sinifikanti meta mqabbel ma '
dak mill-kontroll mhux trattat u l-mezz ikkundizzjonat mhux espost. (d) Ma nstabet l-ebda differenza sinifikanti
fin-numru ta '293 ċelloli T fil-mezz ikkundizzjonat taċ-ċelloli A549 wara l - espożizzjoni meta mqabbel ma' dak fil -
gruppi mhux trattati u mhux esposti (* P<0.05, vs the no-exposure control group; * P<0.05,vs the no-transfer control
grupp).
Se nkomplu naġġornaw il-kontenut tal-karta, għalhekk nibqgħu sintonizzati mat-taqsima tal-għarfien tal-industrija tagħna!